分光光度计的基本结构和工作原理
分光光度计的分类
1.红外分光光度计: 测定波长范围为大于760 nm的红外光区
2.可见光分光光度计: 测定波长范围为400~760 nm的可见光区
3.紫外分光光度计: 测定波长范围为200~400 nm的紫外光区
分光光度计的光谱范围
包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200~400 nm的紫外光区.不同的光源都有其*的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.
钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400~760nm波长的光谱,光通过三棱镜折射后,可得到由红,橙,黄,绿,蓝,靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源.
分光光度计工作原理
人眼可见的光只占电磁波谱的很小—部分(400~760nm)
它是一种频率较大的电磁波.电磁波按频率大小,从频率zui小的无线电波到频率的γ-射线排成一列,即组成电磁波的波谱.
物质的吸收光谱
如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质.
分光光度计的基本结构
无论哪一类分光光度计都包括 :光源,单色器,吸收池,检测器和测量仪表.分光光度计各部件的次序如图所示:
5个基本部件
分光光度计的基本部件(1):光 源: 分光光度计上常用的光源有两种:钨丝灯或氢灯,在可见光区,近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源;在紫外光区多使用氢弧灯.单色器:把混合光波分解为单—波长光的装置.在分光光度计中多用 作为色散元件.
吸收池比色杯,比色皿,比色池)一般由玻璃,石英或熔凝石英制成,用来盛被测的溶液.在低于350 nm的紫外光区工作时,必须采用石英池或熔凝石英池.
分光光度计的基本部件(2): 吸收池(比色皿)必须与光束方向垂直.此外,每套比色皿的质料,厚度应*相同,以免产生误差.比色皿上的指纹,油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性,因此在使用前务必*清洗.
常用光电池,光电管和光电倍增管三种. 测量装置 —般常用的紫外光和可见光分光光度计有3种测量装置,即电流表,记录器和数字示值读数单元.现代的仪器常附有自动记录器,可自动描出吸收曲线.